试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；
试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。
产品简介：
产品名称：花青素还原酶（ANR）试剂盒说明书
规格：24样 48样 48样 96样
货号：AS370
检测方法：紫外分光光度法 紫外分光光度法 微板法 微板法
产品分类：苯丙烷代谢途径
贮存温度：2～8℃。
本试剂盒保质期：6个月。本产品仅用于科研实验。
所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备
① 组织样本：
取约 0.1g 组织（水分充足的样本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min，取上清作为待测液。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；
12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（10
4）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。 ③ 液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。
CLEC2D/OCIL CLEC2D抗体 规格: 0.2ml
KNDC1 脑9抗体 规格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgM/PE PE标记的兔抗小鼠IgM 规格: 0.1ml
ASB4 含锚重复序列-细胞因子信号抑制物盒家族4抗体 规格: 0.2ml
Lambda Light Chain λ轻链抗体 规格: 0.1ml
Thioredoxin 2 线粒体硫氧还2抗体 规格: 0.1ml
Rabbit anti-MG IgG/PE PE标记的兔抗爪沙鼠IgG 规格: 0.1mlNonylphenol 壬基抗体 规格: 1ml
TSPAN3 四分子交联体3抗体（四旋） 规格: 0.2ml
phospho-PAK1(Thr212) 磷化p21激活激1抗体 规格: 0.1ml
Rabbit Anti-Biotin/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗抗体IgG 规格: 0.1mlPhospho-Paxillin(Tyr88) 磷化桩Paxillin抗体 规格: 0.1ml
MIP2/GRO Beta/CXCL2 巨噬细胞炎症2（ GRＯβ）抗体 规格: 0.1ml
花青素还原酶（ANR）试剂盒说明书1916-07-03,4,5-三 规格： 20mg
73030-71-4白术内酯III; 苍术内酯III 规格： HPLC≥98%,20mg/支
31721-94-55,7-二羟基色原 规格： HPLC≥98%;20mg
55905-53-8波必利 规格： 50mg
N-乙酰-L- 规格： 100mg/支
63223-86-9人参皂Rh1 规格： 20mg
65141-46-0可地尔 规格： 100mg
117718-60-2噻唑烟;纯品型;标准品;有证书 规格： 0.1g
129741-57-7白头翁皂甙 B4 规格： HPLC≥98%，20mg/vial
36284-77-2刺五加叶中;Hederasaponin 规格： 20mg
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。
