酶联免疫试剂盒采用的是两步竞争法，样品中的游离磺胺与酶标板上的包被抗原先竞争结合磺胺特异抗体（磺胺类药物一抗），磺胺特异抗体再与酶标记二抗结合，通过洗涤洗掉未结合的磺胺特异抗体、酶标记二抗，再通过酶的专一性显色剂显色，根据显色的深浅来判断样品中磺胺含量。根据竞争性原理，如果样品中的游离磺胺量少，则酶标记的磺胺结合的多，显色深，反之，则显色浅。检测时设置标准曲线，通过标准曲线测定样品中磺胺的含量。
　　酶联免疫试剂盒是酶免疫测定技术中应用广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA(酶联免疫吸附试验)法有双抗体夹心法和间接法，前者用于检测大分子抗原，后者用于测定特异抗体。
　　酶联免疫试剂盒注意事项：
　　1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
　　2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
　　3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
　　4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
　　5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
　　6.在储存和温育时避免强光直接照射。
　　7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
　　8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
　　9.不能使用过期产品。
　　10.如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
　　酶联免疫试剂盒贮存方式：
　　保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。