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禽腺病毒PCR试剂盒注意事项方法
点击次数:1060 更新时间:2021-03-02

禽腺病毒PCR试剂盒样品的采集:

按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃。但不能超过6个月,标本运送应采用0℃。

血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。

血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二胺四乙酸二钠)或柠檬酸钠抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。

拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。

病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。

样品RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。

禽腺病毒PCR试剂盒注意事项:

(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。

(2) 所有使用的离心管高压灭菌,而且必须不含RNA酶。

(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。

(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。

(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。