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ELISA检测结果解读
点击次数:752 更新时间:2023-04-23

   ELISA检测结果可以定量、定性或半定量地解释。在定量检测中,使用已知标准的连续稀释液来生成标准曲线,通常是光密度(OD)与浓度的关系。由此,可以计算出未知样品中目标物的精确数量。

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                       标准曲线计算和ELISA实验中未知物目标浓度测定示例

  在定性检测中,通常仍会通过使用酶标仪来收集数据,但结果将通过与没有标准曲线的空白和/或阴性孔的比较来解释为阳性或阴性。

  半定量检测也是在不使用连续稀释或标准曲线的情况下收集数据。然而,包含阴性和阳性标准,通常是高阳性和低阳性,有利于相对比较未知样本井和已知状态的样本孔之间的水平。

通过使用这些标准来监测检测的可重复性,可以设定一个临界值,超过临界值的结果确定为阳性,低于临界值的为阴性。一些检测方法可能还包括一个“灰区"。对于数值落在这个区域的样品,建议重新测试或进一步调查。

  虽然定量检测在某些情况下可能是可取的,但在每块板上包含一条完整的标准曲线会占用宝贵的孔位。因此,根据用户希望从检测结果中获得的信息,存在一种权衡。

  像许多检测方法一样,从ELISA获得的结果很少可能是100%准确的,假阳性和假阴性结果都有可能。因此,大多数测试将与灵敏度和特异性相关;它们越接近100%,测试就越好。

有许多因素会影响这些值,例如:

1、非特异性结合或交叉反应的高背景;

2、抗体对其目标亲和力差;

3、非最佳检测条件;

4、样本条件和复杂性。

因此,计算灵敏度和特异性的数值是许多ELISA检测方法发展的一个重要步骤,特别是在诊断环境中,以确定获得的任何结果的信息量和可靠性。