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ELISA检测的时间因试剂盒类型和操作熟练度而异,通常在3-6小时完成,但一步法试剂盒可将时间缩短至1-1.5小时。具体时间如下:
一、经典ELISA检测时间(约4-6小时)
样本处理与加样:约1小时(包括样本准备、标准品稀释和加样)。
孵育与洗涤:约2-3小时(每步孵育和洗涤需静置和清洗)。
显色与终止:约30分钟。
读数与分析:约30分钟。
总时间:约4-6小时,受样本量、操作熟练度和仪器影响。
二、一步法ELISA检测时间(约1-1.5小时)
原理:将酶标抗体与检测试剂预混,实现一步加样和单次孵育洗涤。
时间:约90分钟完成,部分试剂盒宣称1小时完成。
优势:操作简便,适合高通量和时间紧迫的项目。
三、影响检测时间的因素
样本量与通量:样本量大时,96孔板可提高效率。
操作熟练度:熟练操作可缩短时间至3-4小时。
试剂盒类型:一步法试剂盒显著缩短时间。
样本状态:复杂样本(如混浊、污染)需额外处理,延长检测时间。
四、如何缩短检测时间
选择一步法试剂盒(如Proteintech Speedy™系列)。
优化实验流程,提前准备试剂和仪器。
使用自动化设备(如洗板机、酶标仪)减少手动操作。
总之,经典ELISA需4-6小时,一步法仅1-1.5小时,具体取决于试剂盒和操作条件。