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大鼠ELISA试剂盒使用技巧建议
点击次数:697 更新时间:2018-12-03
  大鼠ELISA试剂盒通常是采用手工操作的以微孔板条为固相的测定模式,一般涉及到标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面,其中任一步骤的不当都会影响测定结果,且尤以加样、温育和洗板等步骤为甚。只要我们细心,测定操作其实非常简单。
  大鼠ELISA试剂盒实验原理:
  用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素,经过*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
  大鼠ELISA试剂盒性能:
  1.灵敏度:至小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
  2.特异性:不与其它细胞因子反应。
  3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
  大鼠ELISA试剂盒标本要求:
  1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
  2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
  大鼠ELISA试剂盒使用技巧建议:
  ·建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
  ·为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
  ·未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。