你遇到过ELISA试验中酶标板失效的情况吗
点击次数:723 更新时间:2018-12-21
在进行ELISA试验时,如果遇到酶标板失效的情况,就会影响到后期的实验结果,那么在哪些情况下酶标板会失效呢,接下来小编为大家介绍一下。
1、通常商品化的酶标板要求密闭4℃保存,长时间暴露或未密闭保存,就会导致酶标板失效,或者影响到终的测试结果。
2、第三板是否*按照前两板加所有试剂,如果缺失其中某一步骤,结果也会无色。
一般来说,ELISA试剂盒的保质期都在一年上下,如何保存得当,就不会出现问题,但注意在使用中尽量不要反复冻融,试剂盒保存适当的环境温度是4℃左右,同时建议大家ELISA试剂盒解冻后一次用完,已开封或者使用后,剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,ELISA检测试剂盒开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。另外,如果将ELISA试剂盒刚从冰箱里面拿出来就立即使用的话,可能会影响,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。
由此,小编建议大家:先从冰箱中拿出来,在室温下放置20分钟以上后,再进行测定,以使试剂盒在ELISA检测试剂盒使用前与室温平衡。这样做的目的,主要是为了在后面的温育反应步骤中,能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度,以满足测定要求。
接下来小编再为大家介绍在进行ELISA试验时,我们都应注意哪些事项:
1、从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
3、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
4、请每次测定的同时做标准曲线,做复孔,如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5、 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。