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PCR检测试剂盒对于不同的样品有着不同的处理方法
点击次数:624 更新时间:2020-01-02
  PCR检测试剂盒是一种敏感性高,特异性强,重复性好的试验办法。由于其试剂安稳、易保存,操作简便,成果判别较客观等要素,已广泛应用在免疫学查验的各领域中。ELISA试剂盒回收率是反响待测物在样品分析进程中的损失的程度,损失越少,回收率越高。
  通常我们可用于PCR检测试剂盒检测的样本是有多种类型的,如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等,不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。正确的处理样本是保证检测的正确性和准确性的重要步骤,下面简单介绍一下。
  1、血清是zui常用于PCR检测试剂盒检测的一类样本,处理也比较简单。
  用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜,使血清析出。(将试管或离心管倾斜放置,使液面横截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃ 1000×g离心20分钟,仔细收集上清。建议将血清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
  2、血浆
  用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本,标本采集后30min内4℃ 1000×g离心15min,取上清即血浆。将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等,检测时还应仔细阅读试剂盒说明书,检查试剂盒是否对抗凝剂有特殊要求。
  3、细胞裂解液
  1)吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
  2)收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。
  3)加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。
  4)将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷冻,再放室温解冻样品,反复冻融几次,使细胞充分裂解。也可将样品进行超声破碎,以达到裂解的目的。