进口elisa检测试剂盒所采用的方法及基本原理介绍
点击次数:619 更新时间:2020-12-18
进口elisa检测试剂盒是一种常用的固相酶免疫测定方法,由于ELISA方法灵敏,特异性强不需要特殊设备,所以被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在临床检验中除正常反应外,有时常可见到一些错误结果(即假阳性或假阴性)。
溶血标本及混有红细胞的血清采用ELISA法检测易产生假阳性。可能是溶血血清中含有过氧化酶物质(红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素),在洗涤过程中往往难以*洗脱,它可使H2O2释放出原生态氧,从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质,即显蓝色,产生假阳性,所以严重溶血标本禁用。
在冰箱中保存过久的标本,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、造成假阳性;为克服上述干扰,ELISA试剂盒测定的血清标本宜为新鲜采集;如不能立即测定,5d内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存。冻存后融解的标本,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混合后再测定,但混匀时应轻柔,不可强烈振荡。
进口elisa检测试剂盒的基本原理有三条:
1、抗原或抗体可通过共价键与酶联接形成酶联络物,其而此种酶联络物仍能坚持其免疫学和酶学活性。
2、抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分彼此吸附,并坚持其免疫学活性。
3、酶联络物与相应抗原或抗体联络后,可依据参与底物的颜色反应来判定是不是有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显现试验效果。
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