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曲霉属通用PCR试剂盒所用试剂的配制方法分享
点击次数:429 更新时间:2022-02-15
  曲霉属通用PCR试剂盒适用于反应后去除引物、酶、矿物油、甘油、盐等杂质;也同样适用于酶切、连接、磷酸化、补平或切平、随机引物等反应后的DNA纯化,纯化所得DNA可直接用于酶切、连接、转化细菌、测序、PCR、杂交等后续操作。
  曲霉属通用PCR试剂盒采用*的酶系统,样品无需裂解,无需DNA提取和纯化,可以直接进行PCR反应,适用于大规模样品的高通量PCR筛选,也适用于其他如基因分型,转基因的筛选,基因敲除分析和测序等应用,无需DNA提取与纯化过程,样品直接进行PCR,能够耐受未纯化样本中存在的多种PCR抑制剂,每次使用前请轻轻摇匀后使用。PCR产物中含有的纳米材料一般不影响电泳等后续操作。
  下面要为大家介绍的是曲霉属通用PCR试剂盒所用试剂的配制方法:
  1、标准品
  (1)从试剂盒中取出一支标准品,于6000-10000rpm离心30秒。用1ml样本稀释液溶解,并用吸头对准冻存管底部反复吸打5次以助溶解,充分混匀得到标准品S7,放置备用。
  (2)取7个1.5ml离心管(S0-S6)依次排列,各加入250μl样本稀释液。吸取250μl标准品S7到*个离心管中(S6),轻轻吹打混匀。从S6中吸取250μl到第二个EP管中(S5),轻轻吹打混匀。以此类推进行标准品的倍比稀释。S0为样本稀释液。
  2、洗液工作液浓洗涤液按1:25倍用去离子水进行稀释。例如用量筒量取240ml去离子水,倒入烧杯或其他洁净容器中,再量取10ml浓洗涤液,均匀加入,搅拌混匀,在临用前配妥。浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
  3、生物素标记抗体工作液生物素标记抗体液按1:100倍用生物素标记抗体稀释液进行稀释。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液,轻轻混匀,在临用qian10分钟内配妥。
  4、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液辣根过氧化物酶标记亲和素按1:100倍用辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液进行稀释。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液,轻轻混匀,在使用前十分钟内配妥。