规范存放基因染料法PCR试剂盒是保障可重复使用的关键前提
点击次数：21 更新时间：2026-01-08
基因染料法PCR试剂盒是分子生物学实验中进行DNA定量扩增的核心工具，广泛应用于基因表达分析、病原体检测及SNP筛查等领域。其核心组分热启动Taq酶、dNTPs、缓冲液、荧光染料及引物/探针，对温度、光照、湿度及反复冻融极为敏感。一旦存放不当，极易导致酶活性下降、染料降解或引物水解，造成扩增效率降低、非特异性条带增多甚至实验失败。因此，科学、规范的存放
基因染料法PCR试剂盒，是保障高灵敏、低背景、可重复的关键前提。
一、严格分区，按需分装
主储存区（–20℃）：未开封试剂盒应整体存放于–20℃无霜冰箱（避免频繁除霜导致温度波动）；
工作分装区（–20℃或4℃）：使用时将MasterMix、引物等按单次用量分装至0.2mLPCR管，避免整瓶反复冻融；
短期使用区（4℃）：当日实验所需分装管可暂存于4℃避光冷藏，但不超过8小时，用后立即放回–20℃。
二、避光防潮，密封严实
SYBRGreenI等荧光染料遇光易淬灭，所有含染料组分必须使用棕色管或铝箔包裹保存；
每次取用后立即旋紧管盖，防止空气中水分进入导致dNTP水解或Mg??沉淀；
在干燥环境中操作，建议在超净台内开盖，并使用带滤芯吸头减少污染。
三、杜绝反复冻融
酶和MasterMix反复冻融3次以上，活性损失可达30%；
分装体积以10–20μL/管为宜，确保单次用完；
若不慎解冻，未使用的分装管不可再次冷冻，应于4℃保存并在24小时内用完。
四、冰箱管理与监控
专用–20℃冰箱不得存放食品或挥发性化学品，避免交叉污染；
冰箱内放置温度记录仪或智能监控设备，确保温度波动≤±2℃；
定期除霜（选择无霜机型更佳），防止冰晶损伤试剂管密封性。
五、特殊组分注意事项
引物/探针：干粉可–20℃长期保存，溶解后建议–80℃冻存，避免–20℃长期存放导致降解；
ROX参比染料（若含）：对光敏感，需全程避光；
阳性对照模板：应与主试剂分柜存放，防止气溶胶污染。
六、使用前准备
从–20℃取出后，在冰上缓慢解冻（约15–20分钟），切勿37℃水浴加速；
轻柔涡旋混匀（避免剧烈震荡产生气泡），短暂离心收集管壁液体；
配制反应体系全程在冰上操作，减少酶提前激活风险。
