自制ELISA试剂盒质控品需要遵循严格的制备和验证流程，以下是关键步骤和注意事项：

一、 核心步骤

1、阳性血清灭活

将阳性血清（如乙肝大三阳患者血清）置于56℃水浴30分钟灭活，避免生物危害。

示例：取150μL灭活血清用于后续稀释。

2、梯度稀释制备

按倍比稀释法（如1:2至1:1024）用小牛血清稀释血清，形成浓度梯度。

操作：10支试管编号，第1管加150μL血清+150μL小牛血清，混匀后取150μL加入第2管，依次稀释至第10管。

3、检测与筛选

用ELISA试剂盒检测稀释后样本，选择OD值为临界值2-3倍的稀释液作为质控品。

示例：临界值0.105时，选取OD值0.21-0.315的稀释管。

4、分装与保存

筛选后的质控品分装至无菌管，-20℃或-30℃冷冻保存，避免反复冻融。

二、关键参数控制表

三、注意事项‌

‌避免污染‌：操作过程中需更换枪头，防止交叉污染。

‌稳定性验证‌：质控品需定期验证其稳定性，确保在有效期内性能可靠。