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可通过以下方法降低转基因探针法PCR试剂盒存在的误差
点击次数:444 更新时间:2023-01-05
  转基因探针法PCR试剂盒是使用聚合酶链式反应进行的核酸同步扩增和检测/定量的方法,是一种可支持研究应用的多用途强大工具,查找经过优化的实时预混液、试剂和试剂盒,推动您的实验进展。适用于常规的反应和一些结构复杂的模板如GC含量高、有二级结构等的扩增,由于多种增强剂和稳定剂的发现,稳定预配好的混合液不仅简化了操作程序、减少了污染、降低劳动强度和取样误差。
 
  那么如何降低转基因探针法PCR试剂盒可能存在的误差呢?
 
  1、注意试剂盒保存期,过保存期的试剂不能使用。
 
  2、仔细阅读说明书,严格按照说明书要求进行规范化操作。不同批号的试剂不可混用。值得改进的地方,反复试验确定成立后才能改进。
 
  3、检验技师应具备从事实验室操作的基本素质和实践经验。能熟练操作实验仪器、器械,具有一定总结和分析问题的能力,对实验中出现的意外情况能及时妥善解决。
 
  4、使用校对过的微量移液器,排除自然误差。移液器准确与否对定量检测尤为重要。
 
  5、洗涤*,如若洗板不*,酶结合物本底显色会呈现假阳性。洗涤液要新鲜,现用现配,陈旧的洗涤液会出现本底增高现象,也可能出现假阳性。
 
  6、评估试剂的实用性,试剂的稳定与否,对准确率的高低到头重要。在试剂启用前,应进行阴、阳对照及样品反复比照试验,判定试剂符合要求后方可使用。
 
  7、严控反应时间,反应时间过长,酶失活;反应时间过短,酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充分结合,生成物结构松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假阴性。
 
  8、严格掌握显色时间,显色时间过短,加入终止液反应终止后,底物结合物的量过少,易出现假阴性。超过显色要求时间后显色,应判为假阳性,这可能与试剂本身有关。加显色剂后立即显色,不可报阳性,这可能是本底显色的结果。