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质粒小量快速提取试剂盒

简要描述:

质粒小量快速提取试剂盒公司正在出售的产品:猪骨骼肌卫星细胞(永生化) KBP蛋白封闭多肽 阿菲波菌属通用PCR检测试剂盒 大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)试剂盒 ELISA ATP含量酶活性比色法检测试剂盒(HPLC法) 匍匐散囊菌 卷曲螺旋结构域蛋白43抗体

更新时间:2024-01-12

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质粒小量快速提取试剂盒

PCR 反应需要使用哪些试剂和设备?

试剂:
模板DNAPCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;dNTPsPCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFUPhusion等,用于扩增DNA链;PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物;
设备:
PCR仪:用于控制反应温度,保证PCR反应时不同温度环节的严格控制;电泳槽:用于分离PCR扩增产物;核酸提取仪:从组织样本中全自动提取核酸。 这些试剂和设备在PCR分子生物学技术中均是,只有在有序齐全的基础上,才能进行PCR反应并得出准确结果。

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!

货号

产品名称

规格

A-Hc2015

质粒小量快速提取试剂盒

100 次、100 次×2

保存条件:收到本产品后按照上面指示温度存放各成分,储存18个月不影响使用效果。
产品介绍:
本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.有的去蛋白液配方,可以高效去除残留的核酸酶,即使是核酸酶含量丰富的菌株如JM系列、HB101也可以轻松去除。有效防止了质粒被核酸酶降解。
3.快速、方便,不需要使用有毒的苯、氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好, 可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。6.png

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PCR相关基础实验:

PCR反应基本步骤一般的聚合酶链式反应由2035个循环组成,每个循环包括以下3个步骤:

一、变性:

利用高温(93-98℃)使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前,通常加热长一些时间以确保模板和引物分离,仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟,接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。

二、退火或称接合,复性:

DNA双链分离后,降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。

三、延伸:

DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr(来自于嗜热菌Thermus brockianus)约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。

公司正在出售的产品:

表皮葡萄球菌染料法荧光定量PCR试剂盒

多肽YYELISA试剂盒 Peptide-YY免费代测试剂

甲型流感()病毒H3亚型 染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

地肤子染料法PCR鉴定试剂盒

表皮生长因子途径底物蛋白3ELISA试剂盒 EPN3免费代测试剂

荚膜组织胞浆菌马皮疽变种PCR检测试剂盒说明书

嗜肺军团菌PCR检测试剂盒

补体成分6ELISA试剂盒

耐久肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒

猪水疱疹病毒PCR检测试剂盒

补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白1ELISA试剂盒

木贼镰刀菌染料法荧光定量PCR试剂盒

镰刀疟原虫(恶性疟原虫)染料法荧光定量PCR试剂盒

沉默调节蛋白2ELISA试剂盒

结肠弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒

犬细小病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

丛状蛋白B2ELISA试剂盒

鹦鹉热衣原体PCR检测试剂盒

犬新孢子虫PCR检测试剂盒

单链选择性单功能啶DNA糖基化酶1ELISA试剂盒

牛肺线虫探针法荧光定量PCR试剂盒

镰刀疟原虫(恶性疟原虫)探针法荧光定量PCR试剂盒

蛋白O-葡萄糖基转移酶1ELISA试剂盒

马克洛菌PCR检测试剂盒供应

立克次体通用PCR检测试剂盒

蛋白酶3抗体ELISA试剂盒

绵羊副流感病毒3型PCR检测试剂盒直销

犬副流感病毒PCR检测试剂盒

动力蛋白轴丝重链11ELISA试剂盒

奈瑟菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒

柯萨奇病毒 A4 型核酸检测试剂盒

人核糖体蛋白S9(RPS9)试剂盒ELISA

牛副流感病毒型PCR检测试剂盒

禽呼肠孤病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

FMS样酪激酶3(Flt3)elisa试剂盒

禽腺病毒E型探针法荧光定量PCR试剂盒

巨细胞病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

质粒小量快速提取试剂盒人钙激活中性6(CAPN6)ELISA检测试剂盒

圆弧青霉探针法荧光定量PCR试剂盒

克雷伯菌通用PCR检测试剂盒

N1,N12-二乙酰基精胺 试剂盒ELISA

犬疱疹病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

细小病毒B PCR检测试剂盒

人白介素4受体(IL4R/CD124)ELISA试剂盒

牛副流感病毒3型(BPIV-3)核酸检测试剂盒

PCR反应条件优化:

1、变性温度和时间:

保证模板DNA解链是保证整个PCR扩增成功的关键。加热90~95°C, 30~60s,再复杂的DNA 分子也可变性为单链。温度过高或高温持续时间过长,可对Taq酶活性和dNTP分子造成损害。

2、复性温度和时间:

PCR扩增特异性取决于复性过程中引物与模板的结合。复性温度越高,产物特异性越高。复性温度越低,产物特异性越低。需根据引物的Tm值具体设定。

3、延伸温度和时间:

一般位于Taq酶最适作用温度70~75°C之间。引物小于16个核苷酸时,过高的延伸温度不利于引物与模板的结合,可以缓慢升温到70~75°C。延伸反应时间,可根据待扩增片段的长度而定,小于1kb, 1min足够;大于1kb需加长延伸时间。Taq酶可根据1kb/min增加时间。这里需要注意,延伸时间过长可能出现非特异扩增。因此需要设置恰到好处的延伸时间。

4、循环数:

其他参数选定后,PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。理论上说2025次循环后,PCR产物的积累即可达到最大值,实际操作中由于每步反应的产率不可能达到100%,因此不管模板浓度是多少,20~30次是比较合理的循环次数。循环次数越多,非特异扩增增加。